Антиген представящи функция на дендритни клетки с имуномодулатори. Ефект на имуномодулатор на лимфоцити

Заключителният етап функцията на дендритни клетки като част от вродения имунитет е антиген представяне и като посока на Т-клетъчен имунен отговор. Следователно експерименти се провеждат върху ефекта на антиген IMMP функция на DCs и способността им да представят антиген на наивни Т лимфоцити.

По-специално той е проучен способността на дендритни клетки, образува под влияние на IMMP, стимулиране на пролиферация на лимфоцитите сингенни СВА мишки. За тази цел, ML далака на мишки (106 клетки) koinkubirovali в продължение на 6 дни с DC (5 х 104), получени от костния мозък клетки, изложени IMMP. Като референтни лекарства, използвани LPS К. пневмония и TNF-ф.

оценка пролиферативна активност на ML, стимулирани дендритни клетки се извършват в колориметричен анализ, използвайки жизненоважно багрило AlamarBlue (Biosours, USA). Изчислено стимулационен индекс, който характеризира съотношението на пролиферативна активност на ML когато са стимулирани зрели DC да мл пролиферативна активност, когато са стимулирани незрели DCs.

Формиран под влиянието на IMMP, зрели дендритни клетки стимулира пролиферативна активност на мононуклеарни левкоцити мишки. Активността на тези клетки е сравнимо с активността на DCs зрял след взаимодействие с LPS или TNF-а, с изключение на DCs стимулирани с ARF. В този случай, пролиферацията на лимфоцити, е по-ниска в сравнение с други индуктори на DC съзряване, но по-висока в сравнение с незрели DCs. Това може да са свързани с формирането на група от макрофаги, които са по-долу от дейността на зрели DC. В този случай индексът на стимулиране е 1,4 и във всички други случаи, индексът на стимулиране е в обхвата 2-2.3.

Следните експерименти изследвани антиген-представящи функция на дендритни клетки, получени от костен мозък на мишки, които са се образували по способността на влияние IMMP на DC да представят антиген на Т-лимфоцити се оценява чрез промяната в активността на цитотоксични лимфоцити от тях култивиране в присъствието на DC.

за да направите това, незрели дендритни клетки заредена с лизат на различни туморни клетки и се инкубират с имуномодулатори за 16 часа. DCs се промиват и след това се инкубират с сингенни мишки от лимфоцити в съотношение 01:20 в продължение на 6 дни в RPMI-1640 среда. Контролите бяха DC не третирани лизат на туморни клетки. След това лимфоцитите се промиват koinkubirovali за култивиране туморни линии изследвани в съотношение 5: 1 в продължение на 24 часа.

След това ние оценихме лимфоцитна цитотоксичност върху туморни клетъчни линии от миши лимфом YAC-1, Ehrlich, L929, 562 К в възстановяване на тест на 3- (4,5-диметилтиазол-2-ил) -2,5-дифенилтетразолиев бромид (МТТ-тест). В първия етап се определя способността на DCs настоящите антигени изложени Immunovac-VP-4, контроли бяха DC лекувани TNF-а.

лимфоцитна цитотоксичност срещу тествани туморни линии варират между 33,9-43,9%, добавянето на незрелите DC не води до значително увеличение на този параметър. DCs зрял влияние вода VP-4 ваксина, има способността да представят антиген наивни Т клетки, което води до образуването на цитотоксични ефектори, които са част от специфичен адаптивен имунитет.

Наистина, след като контактуване ин витро Т-лимфоцити от зрял под влияние на различни индуктори на дендритни клетки, които са били натоварени с антигени изследвани трансплантируеми туморни клетъчни линии, Т клетки придобиват способността да лизират представения антиген хомоложна на целевата клетка. DCs активиран Immunovac-PE-4, и се зарежда с туморни антигени, предоставени в хомоложна увеличение система цито-токсичността на 83,5-79,3%. DCh, активирани с TNF-а и заредени с туморни антигени, в хомоложна система, предвидени в същата степен на цитотоксичност 89,1-72,5%. В същото време срещу туморни клетъчни антигени, които не са били лекувани DCs, цито-токсичен активност е по-ниска и варира между 59,3-37,5% активиране Immunovac-VP-4 и 59,3-40,1 % с TNF-а.